Panel marcadores leucemias mieloides agudas FLT3 CKIT MONOSOMIA

Nombre de la prueba:

Panel de leucemias mieloides agudas:
Detección de los marcadores: AML1-ETO t(8;21), PLM-RARα t(15;17), CFBF-MYH11, inv(16).
Mutaciones en el gen FLT3 (ITD, D835Y).
Mutaciones en el gen C-KIT.
Monosomía 7 (FISH).

Otros nombres posibles:

No aplica

¿Para qué sirve?:

Este panel incluye pruebas que permiten caracterizar a pacientes con diagnóstico de Leucemia Mieloide Aguda (LMA) dentro de uno de los tres grupos de riesgo (favorable, intermedio o desfavorable); brinda información pronóstica y permite dirigir de mejor manera el tratamiento del paciente.

Tipo de muestra:

Tipo:
Médula ósea.

Requisitos:

No hemolizada.
No coagulada.
La muestra debe tomarse en condiciones asépticas.

Volumen:

2-4 mL de médula ósea por tubo requerido (Heparina de sodio y EDTA).

Tubo:

Un tubo de Heparina de sodio (tubo de tapón verde) NO heparina de litio. Otros anticoagulantes no son recomendados debido a que son perjudiciales para la viabilidad de las células.
Un tubo plástico con EDTA como anticoagulante (tubo con tapón morado).

Estabilidad de la muestra:

Tubo de heparina de sodio estable 24 horas a temperatura ambiente (NO refrigerar). Almacenar y transportar a temperatura ambiente y protegido del sol.
Tubo EDTA estable por 24 horas a 4°C. Almacenar y transportar a 4°C.

Riesgo de toma de muestra:

Los riesgos de la extracción de médula ósea son mínimos, pueden encontrarse en algunas ocasiones sangrado o infecciones, hematomas y dolor. La médula ósea, debe ser recolectada por un hematólogo, INVEGEM se encarga únicamente de ir por la muestra a la clínica del médico.

Preparación previa a toma de muestra -Fase pre analítica-

No es necesario ayuno.
Diagnóstico presuntivo de LMA.
Debe llenarse la ficha de información clínica y consentimiento informado, este último debidamente firmado.

Metodología:

Detección de marcadores AML1-ETO t(8;21), PLM-RARα t(15;17), CFBF-MYH11, inv(16): Reacción en cadena de la polimerasa, transcriptasa inversa -RT-PCR-.
Mutaciones en el gen FLT3 (ITD, D835Y): El análisis se realiza por medio de una PCR de punto final para identificar la mutación de tipo FLT3-ITD y una PCR-RFLP (digestión enzimática) para identificar la mutación FLT3-TKD.
Mutaciones en el gen C-KIT: Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y secuenciación de Sanger bidireccional.
Monosomía 7 (FISH): La técnica de FISH consiste en la hibridación/unión específica de una sonda (cadena de ADN complementaria que posee una molécula indicadora fluorescente) al cromosoma 7. La muestra de médula ósea previo a la realización de la técnica de FISH es cultivada in vitro y estimulada para su división. Posteriormente son cosechados los núcleos en interfase o metafase los cuales son utilizados para realizar la técnica.

Tiempo de entrega de resultados:

25 días hábiles.

Información clínica:

Descripción de la enfermedad:
La Leucemia Mieloide Aguda (LMA) es un grupo de trastornos hematológicos malignos de progresión rápida, fenotípica y genéticamente heterogéneos, los cuales se caracterizan por la proliferación clonal desregulada de células inmaduras que han perdido la capacidad de diferenciarse normalmente.

Esta leucemia surge como resultado de la transformación de precursores hematopoyéticos a través de la adquisición de rearreglos cromosómicos como AML1-ETO t(8;21), PLM-RARα t(15;17), CFBF-MYH11 e inv(16) y múltiples mutaciones genéticas (FLT3, C-KIT) que bloquean la diferenciación celular y confieren ventajas proliferativas y de supervivencia.

Generalmente una o más anormalidades citogenéticas son encontradas en aproximadamente el 55% de los pacientes con LMA, y debido a esto configuran un fuerte factor pronóstico. Las anomalías del cromosoma 7 (incluyendo la monosomía del cromosoma 7) se asocian con un mal pronóstico en la LMA.

Interpretación del resultado:

Detección de los marcadores: AML1-ETO t(8;21), PLM-RARα t(15;17), CFBF-MYH11, inv(16).
Detección de AML1-ETO: Pronóstico favorable, quimioterapia estándar.
Detección de PML-RARA: Pronóstico favorable, medicamento a administrar: ácido trans-retinoico.
Detección de inv(16): Pronóstico favorable, quimioterapia estándar.
Negativo: No descarta la presencia de un trastorno neoplásico.

Mutaciones en el gen FLT3 (ITD, D835Y).
Variante FLT3-ITD: Pronóstico desfavorable, quimioterapia agresiva.
Variante FLT3-D835Y: Pronóstico desfavorable, quimioterapia agresiva.
Negativo: No se obtuvo información sobre el pronóstico.

Mutaciones en el gen C-KIT.
Variantes CKIT exón 8: Pronóstico desfavorable, quimioterapia agresiva.
Variantes CKIT exón 17: Pronóstico desfavorable, quimioterapia agresiva.
Negativo: No se obtuvo información sobre el pronóstico.

Monosomía 7 (FISH).
La unión de la sonda específica permite detectar en las células del paciente si estas poseen ambos cromosomas 7 (normal= 2 señales fluorescentes correspondientes a 2 cromosomas 7) o si poseen monosomía del cromosoma 7 (anormal= 1 señal fluorescente correspondiente a 1 cromosoma 7).

Horario de toma de muestra

Servicio de recolección de la muestra tomada en otros laboratorios o clínicas: En horario de 8:30 a 11:00 horas, en la Ciudad de Guatemala siempre y cuando se notifique al laboratorio con 24 horas de anticipación para programar la ruta.
Viernes se atenderán solamente emergencias de 8:30 a 11:00 horas.